Presentació
El LPS-RPPC pretén oferir un servei personalitzat de producció a la carta de proteïnes recombinants i la seva posterior purificació per tècniques de cromatografia liquida FPLC. També pretén assessorar i oferir la nostra experiència per a la conjugació de proteïnes amb compostos de baix pes molecular com fàrmacs, linkers o, fluorofors entre altres.
Serveis
El serveis que oferim son:
Estudi i disseny experimental:
- Disseny de proteïnes
- Avaluació de viabilitat del projecte
- Selecció de sistema de expressió
- Disseny del vectors de expressió
- Disseny de estratègies de conjugació.
Producció recombinant de proteïnes:
- Sistema de expressió Procariota: E.coli.
- Sistema de expressió Eucariota: HEK293F.
Purificació de proteines:
- Cromatografia de afinitat (IMAC, StrepTag, GST-Trap)
- Cromatografia de intercanvi ionic (IEX)
- Cromatografia de exclusio per tamany (SEC)
Conjugació de proteïnes:
- Amine-coupling
- Cysteine-coupling
- Sortase A-mediated transpeptidation
Caracterització de proteines:
- SDS-PAGE
- Western-blot
- Dynamic Light Scattering (DLS)
- Multi-Angle Dynamic Light Scattering (MADLS)
- Zeta Potential measurement (ELS)
Responsables
Correu electrònic de contacte: uunzueta@santpau.
Responsable Científic / Responsable Tècnic / Responsable Gestor
Experiència i Trajectòria
El grup de Oncogènesi i Antitumorals (GOA) i concretament la línia de disseny, producció i purificació de nanopartícules i nanoconjugats proteics de la mateixa, te una amplia experiència tant en el camp de de la producció recombinant (en diferents sistemes de expressió) i purificació de proteïnes com en la conjugació de diferents nanomaterials proteics amb compostos de baix pes molecular (fàrmacs, oligo-nucleotids, fluorofors..). En aquest sentit, portem anys dissenyant, produint i caracteritzant diferents tipus de nanomaterials i nanoconjugats proteics amb aplicacions biomèdiques tan en projectes de recerca aplicada com en projectes de transferència industrial com els llistats a continuació:
- CNS2024-154280. CXCR4-Targeted siRNA Therapy against KRAS-driven Colorectal Cancer. (AEI, IP: U.Unzueta).
- FISP/MR2024: Precision nano-immunotherapy against CXCR4+ leukemic stem cells in Acute myeloid leukaemia. (FISP, IP: U. Unzueta).
- PI23/00318: Selective depletion of CXCR4+ colorectal cancer stem cells by targeted inhibition of RNA polymerase II. (ISCIII, IP: U.Unzueta).
- PI20/00400: Site-directed conjugation of smart protein nanomedicines to improve targeted therapy of metastatic colorectal cancer. (ISCIII, IP: U.Unzueta).
- CP19/00028: Improved colorectal cancer therapy by targeting the CXCR4 receptor using functional protein nanoparticles with enhanced cytosolic release. ( ISCIII, IP: U.Unzueta).
Els resultats dels nostres estudis s’han publicat a revistes d’alt impacte científic:
- Garcia-Leon A. et al. Precision targeting of CXCR4+ leukemia cells by a humanized MMAE-nanoconjugate in an AML mouse model. BIOMEDICINE & PHARMACOTHERAPY. 192, 118573. 2025.
- Rueda A. et al., Site-directed cysteine coupling of disulfide-containing non-antibody carrier proteins (THIOCAPs). SCIENCE CHINA-MATERIALS. 66, 4109-4120. 2023.
- Pallares V. & Unzueta U. et al A multivalent Ara-C-prodrug nanoconjugate achieves selective ablation of leukemic cells in an acute myeloid leukemia mouse model. BIOMATERIALS. 280, 121258. 2023.
- Pallares V. et al. An Auristatin nanoconjugate targeting CXCR4+ leukemic cells blocks acute myeloid leukemia dissemination. J HEMATOL ONCOL. 13-36. 2020.
- Cespedes MV. et al, Selective depletion of metastatic stem cells as therapy for human colorectal cancer. EMBO MOL MED. 10-10, e8772. 2018.
Equipament
Equipament implicat en la realització del servei:
- Sistema de cromatografia liquida de proteïnes Akta Pure 25 M1 (Cytiva)
- Sistema de Multi Angle Dynamic Light Scattering (MADLS) Zetasizer Ultra Red (Malvern Panalytical)
- Homogenitzador de alta pressió Emulsiflex-C5 (Avestin)
