Presentación
El LPS-RPPC pretende ofrecer un servicio personalizado de producción a medida de proteínas recombinantes y su posterior purificación mediante técnicas de cromatografía líquida FPLC. También busca asesorar y ofrecer nuestra experiencia en la conjugación de proteínas con compuestos de bajo peso molecular, como fármacos, enlaces o fluoróforos, entre otros.
Servicios
Los servicios que ofrecemos son:
Estudio y diseño experimental:
- Diseño de proteínas
- Evaluación de viabilidad del proyecto
- Selección del sistema de expresión
- Diseño de los vectores de expresión
- Diseño de estrategias de conjugación
Producción recombinante de proteínas:
- Sistema de expresión procariota: E. coli
- Sistema de expresión eucariota: HEK293F
Purificación de proteínas:
- Cromatografía de afinidad (IMAC, StrepTag, GST-Trap)
- Cromatografía de intercambio iónico (IEX)
- Cromatografía de exclusión por tamaño (SEC)
Conjugación de proteínas:
- Acoplamiento a aminas (Amine-coupling)
- Acoplamiento a cisteínas (Cysteine-coupling)
- Transpeptidación mediada por Sortasa A (Sortase A-mediated transpeptidation)
Caracterización de proteínas:
- SDS-PAGE
- Western blot
- Dispersión de luz dinámica (Dynamic Light Scattering, DLS)
- Dispersión de luz dinámica multiángulo (Multi-Angle Dynamic Light Scattering, MADLS)
- Medición de potencial zeta (Zeta Potential measurement, ELS)
Responsables
Correo electrónico de contacto: uunzueta@santpau.
Responsable Científico / Responsable Técnico / Responsable Gestor
Experiencia y Trayectoria
El grupo de Oncogénesis y Antitumorales (GOA), y concretamente la línea de diseño, producción y purificación de nanopartículas y nanoconjugados proteicos, tiene una amplia experiencia tanto en el campo de la producción recombinante (en diferentes sistemas de expresión) y purificación de proteínas, como en la conjugación de distintos nanomateriales proteicos con compuestos de bajo peso molecular (fármacos, oligonucleótidos, fluoróforos, etc.). En este sentido, llevamos años diseñando, produciendo y caracterizando diferentes tipos de nanomateriales y nanoconjugados proteicos con aplicaciones biomédicas, tanto en proyectos de investigación aplicada como en proyectos de transferencia industrial, como los listados a continuación:
- CNS2024-154280: Terapia con siRNA dirigida a CXCR4 contra el cáncer colorrectal impulsado por KRAS. (AEI, IP: U. Unzueta).
- FISP/MR2024: Nano-inmunoterapia de precisión contra células madre leucémicas CXCR4+ en leucemia mieloide aguda. (FISP, IP: U. Unzueta).
- PI23/00318: Eliminación selectiva de células madre de cáncer colorrectal CXCR4+ mediante inhibición dirigida de la RNA polimerasa II. (ISCIII, IP: U. Unzueta).
- PI20/00400: Conjugación dirigida de nanomedicinas proteicas inteligentes para mejorar la terapia dirigida del cáncer colorrectal metastásico. (ISCIII, IP: U. Unzueta).
- CP19/00028: Mejora de la terapia del cáncer colorrectal mediante el uso de nanopartículas proteicas funcionales que se dirigen al receptor CXCR4 con liberación citosólica mejorada. (ISCIII, IP: U. Unzueta).
Los resultados de nuestros estudios se han publicado en revistas de alto impacto científico:
- Garcia-Leon A. et al. Precision targeting of CXCR4+ leukemia cells by a humanized MMAE-nanoconjugate in an AML mouse model. BIOMEDICINE & PHARMACOTHERAPY. 192, 118573. 2025.
- Rueda A. et al., Site-directed cysteine coupling of disulfide-containing non-antibody carrier proteins (THIOCAPs). SCIENCE CHINA-MATERIALS. 66, 4109-4120. 2023.
- Pallares V. & Unzueta U. et al. A multivalent Ara-C-prodrug nanoconjugate achieves selective ablation of leukemic cells in an acute myeloid leukemia mouse model. BIOMATERIALS. 280, 121258. 2023.
- Pallares V. et al. An Auristatin nanoconjugate targeting CXCR4+ leukemic cells blocks acute myeloid leukemia dissemination. J HEMATOL ONCOL. 13-36. 2020.
- Cespedes MV. et al. Selective depletion of metastatic stem cells as therapy for human colorectal cancer. EMBO MOL MED. 10-10, e8772. 2018.
Equipamiento
Equipamiento implicado en la realización del servicio:
- Sistema de cromatografía líquida de proteínas Akta Pure 25 M1 (Cytiva)
- Sistema de Multi Angle Dynamic Light Scattering (MADLS) Zetasizer Ultra Red (Malvern Panalytical)
- Homogenizador de alta presión Emulsiflex-C5 (Avestin)
